食用菌的菌种制备

食用菌的菌种系指经人工培养并进行扩大繁殖和用于生产的菌丝体。菌种的优劣主要取决于菌株原有的种性及制种技术水平的高低。


一、 工艺流程


培养料的贮备和预处理——容器、工具的洗涤——配料、培养基制作——灭菌——冷却——接种——培养——贮存


二、 纯种分离


菌种的分离方法主要有:孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。

1.孢子分离法:属有性繁殖。

对于香菇、平菇异宗结合的菇类,为避免产生单孢不孕现象,必须采用多孢分离法。单孢分离法主要用于杂交育种的研究。

(1)种菇的选择和处理

种菇选择的标准:必须纯正,具有本菌株性状,发育健壮,无病虫害,成熟度适当。种菇选定后,首先除去附着在菇体表面的杂物,如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分钟,然后用无菌水漂洗3次,以洗除表面附着的药物,最后用无菌纱布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精进行表面消毒。

(2)多孢分离法
① 整菇播种法② 钩悬法③ 贴附法 4菌褶上抹取孢子法⑤ 孢子印分离法 ⑥ 空中孢子捕捉法

(3)单孢子分离法

一般采用方法:平板稀释法、连续稀释法、毛细管法等。


2.组织分离法

(1)子实体分离法(2)菌核分离法(3)菌索分离法:对一些不易找到子实体及菌核的菌类


3.基内菌丝分离法

对于子实体只有在特定的季节下出现,平时不易采到,或子实体小而薄或呈胶质状态

(1)菇木(或耳木)分离法:在食用菌繁殖旺盛期从菇木中分离菌丝体。

(2)代料基质分离法:分离前,选择一批子实体发生早、产量高、菇体尚幼嫩且生活力强而无病虫害的栽培袋,待子实体将近成熟时,去掉子实体,然后用75%酒精将培养袋进行消毒后,在培养料下1.5cm处挑取0.3cm的培养料小方块组织,接入试管培养基的中央,置于恒温下培养。

(3)土中菌丝分离法:用于采集生长在土中的菇类菌丝体


三、保藏及复壮


1.菌种保藏方法

菌种保藏的基本手段是采用低温、冷冻、干燥、减少供氧量等方法,终止其繁殖,降低其代谢强度,使之处于休眠状态。

(1)斜面低温保藏法:保藏时间不长。

(2)液体石蜡保藏法:保藏期限可达3-5年。

(3)滤纸保藏法:保藏期限可达2-5年。

(4)真空冷冻干燥保藏法:保存时间可达数年

(5)液态氮超低温保藏法:国际流行的新技术。


2.菌种复壮技术
  提纯复壮。主要有组织分离法及菌丝体复壮的方法。


四、菌种繁育
  菌种的生产仍是采用三级制种方法.即母种,原种,生产种.要想生产出合格的菌种,必须先培育出母种,而后由母种制成原种,由原种制成生产种.而后用生产种转接成栽培袋,再进行出菇管理.


1.母种

又叫一级种,用直径18-22cm的试管制备。常用配方:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂10-20克,水1000毫升,先把土豆去皮称重,切成小块煮至熟而不烂,过滤加水至1000毫升,再把琼脂剪成小段,放入锅内,边搅边煮,待琼脂溶化后加入葡萄糖,由于琼脂质量各有不同加入份量要看情况而定,装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管,用棉花塞塞住试管口,放入小高压锅内灭菌,当压力表达到1.5个压力时,再灭菌30分钟,取出试管放成斜面,放置2-3 天后,无杂菌感染再放入接种箱内接种,接了种的试管放入培养室内进行培养,温度要求25℃左右,相对湿度75%以下。


2.原种

二级种,一般采用原种瓶和罐头瓶.培养料不要装的太满,装至瓶肩.原种的制备多采用谷粒种,锯沫种和棉子壳种。

①谷料种:用玉米、小麦为原料,精选后煮沸,使种子变软即成,不要煮的太熟,开花.熟后离火泡5分钟(不开盖而能吸足水份)而后装瓶,用小型或中型高压锅灭菌,放至温度25℃左右接入母种,放培养室内培养.一般25-30天即成。

②木屑种:木屑78%、麦麸20%、石膏1%、糖1%、料:水=1:1.3,拌匀装瓶,灭菌,接种培养。一般25-30天即成。

③棉子皮:因棉子皮各种营养丰富,一般不需要加其它物质,只加1%的糖和石膏,用料1.3-1.5倍的水拌匀即可,而后装瓶,灭菌,接种,培养即可。

推荐通用配方:木屑(或秸秆粉或棉籽壳)80斤,糠麸6斤,糖0.5斤,菇耳壮1.6两,石膏1斤


3.生产种

可用木屑,玉米,棉籽皮,菌草,麦秸等为原料,根据所栽培的品种,采用不同的配方,用聚乙烯或聚丙烯,直径15-28cm塑料袋装料,然后用常压灭菌锅灭菌,达到100℃后,再维持100℃8-10小时.待袋稍凉后出锅,使栽培袋温度降至25℃左右再用原种接种,而后放到培养室的培养架上培养。